PRAKTIKUM BAKTERI, UJI TSIA

BAB III

METODE PRAKTIKUM

III.1 Alat dan bahan

A. Alat

1)      Autoclave

2)      Inkubator

3)      Osse

4)      Pipet tetes

5)      Spiritus

6)      Rak Tabung

B. Bahan

1)      Kapas

2)      Koloni bakteri (Escherichia Coli, Klebsiella Pneumoniae, Stapylococcus Aureus)

3)      Indikator Fenol merah atau fenol ftalein (PP)

4)      Media TSIA

III.2 Prosedur Kerja

1. Disiapkan alat dan bahan

2. Dipijar osse diatas lampu spiritus

3. Diambil koloni bakteri menggunakan osse

4. Diinkubasikan pada media TSIA

5. Diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37⁰c

6. Dikeesokkan harinya dilakukan pengamatan dengan menambahkan indicator fenol merah atau phenol ftalein

7. Dicatat hasilnya

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

IV. Hasil

No.	Nama Bakteri	Lereng	Dasar	H2S	Gas
1.	Escerichia Coli Salmonella Thypi Klebsiella Pneumoniae	Asam Basa Asam	Asam Basa Asam	- + -	+ + +
2	Klebsiella Pneumoniae Stapylococcus Aureus Salmonella Thypi	Asam Asam Basa	Asam Asam Basa	- - +	+ - +
3	Klebsiella Pneumoniae Stapylococcus Aureus Escherichia Coli	Asam Asam Asam	Asam Asam Asam	- - -	+ - +
4	Klebsiella Pneumoniae Stapylococcus Aureus Escherichia Coli	Asam Asam Asam	Asam Asam Asam	- - -	+ - +
5	Klebsiella Pneumoniae Escherichia Coli Salmonella Thypi	Asam Asam Basa	Asam Asam Basa	- - +	+ + +
6	Klebsiella Pneumoniae Eschrichia Coli Salmonella Thypi	Asam Asam Basa	Asam Asam Basa	- - +	+ + +

IV.2 Pembahasan

   Baktri memiliki berbagai aktivitas biokimia dengan menggunakan nutrien yang diperoleh dari lingkungannya. Setiap bakteri memiliki kemampuan dalam menggunakan enzim yang dimilikinya untuk menghidrolisa molekul kompleks menjadi molekul yang sederhana. Metabolisme atau penggunaan dari molekul organic ini biasanya menghasilkan produk sampingan yang dapat digunakan untuk identifikasi bakteri. Untuk melihat kemampuan tersebut maka dilakukanlah uji biokimia diantaranya Uji Fermentasi Karbohidrat, Uji MR-VP, Uji Katalase dan Oksidase, Uji Sitrat, Uji Indol, dal lain-lain.

     Dalam praktikum kali ini uji biokimia yang dilakukan pada bakteri menggunakan media TSIA. Media Triple Sugar Iron Agar (TSIA) merupakan salah satu metode yang digunakan untuk melihat kemampuan bakteri dalam memfermentasikan gula-gula,selain itu melihat pula kemampuan bakteri dalam menghasilkan gas dan H₂S dari proses fermentasi tersebut. Hasilnya sendiri memberikan hasil yang berbeda-beda sesuai dengan bakterinya. Bekteri yang digunakan pada praktikum kali ini adalah Escerichia coli, Salmonella thypi, Stapytococcus aureus, dan Klebsiella pneumonia, dengan hasil:

1.       E scerichia coli

E. coliI merupakan salah satu bakteri gram negative (-) bentuk basil. Pada uji fermantasi gula-gula kali ini dengan menggunakan media TSIA, E coli memberikan hasil positif asam pada bagian lereng dan dasar (media berwarna kuning). Hal tersebut bissa terjadi karena bakteri E. coli memiliki enzim betagalaktosidase dan sukrase yang dapat memecah laktosa menjadi glukosa dan galaktosa serta memecah sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa. Setelah semuanya menjadi gula sederhana, maka E. coli dapat melakukan proses fermentasi. Selain itu juga terbentuk gas namun negative H₂S karena tidak mampu mendesulfurasi asam amino dan methion yang akan menghasilkan H₂S.

2.       Salmonella Thypi

Salmonella thypi  pada media TSIA sendiri tidak memberikan hasil yang positif untuk memfermentasi laktosa, sukrosa, dan glukosa karena tidak memiliki enzim seperti  pada bakteri E. coli. namun bakteri H₂S sendiri memberikan hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya warna hitam. Warna hitam itu sendiri terbentuk dari hasil bakteri S. thypi dalam mendesulfurasi asam amino dan methion sehingga menghasilkan H₂S selanjutnya H₂S berikatan dengan Fe²⁺ yang terdapat pada media menyebabkan warna media menjadi hitam. Selain itu terbentuk pula gas.

3.       Klebsiella pneumoniae

K. pneumoniae sama halnya dengan E. coli memiliki enzim betagalaktosidase dan enzim sukrase yang mampu memecah laktosa menjadi gluktosa dan fruktosa serta memecah sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa. Sehingga setelah semuanya menjadi gula sederhana, K. pneumoniae memfermentasikannya dengan menghasilkan asam (media berwarna kuning) dan gas. Tetapi negatif H₂S .

4.       Staphylococcus aureus

S. aureus juga memiliki enzim yang sama seperti E. coli dan K. pneumoniae sehingga mampu memfermentasikan ketiga jenis gula-gula mengahasilkan asam (media menjadi kuning) namun negative gas dan H₂S seperti yang dijelaskan diatas.

  

BAB V

PENUTUP

V.1. kesimpulan

Dari hasil praktikum diperoleh hasil:

1.       Bakteri E. coli : lereng dan dasarnya berwarna kuning (positif asam), namun gas negative H₂S.

2.       Bakteri S. thypi : lereng dan dasarnya berwarna merah (negative basa), positif gas dan H₂S.

3.       Bakteri S. aureus : lereng dan dasarnya berwarna kuning (positif asam), namun negative H₂S dan gas.

4.       Bakteri K. pneumoniae : lereng dan dasarnya berwarna kuning (positif asam), namun gas negative H₂S

V.2. saran

Dalam melakukan praktikum harus cermat dan teliti sehingga diperoleh hasil yang maksimal.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim,2008. Laporan koastisensi mikrobiologi. Diakses tanggal 2 desember 2012.

Gianella RA.1979. importance of the intestinal imflammatory reaction in Salmonella mediated intestinal selection. Infect immun.